服务简介
利用哺乳动物细胞表达外源蛋白已广泛应用于生物产品的制备。哺乳动物细胞具有易被转染,遗传稳定,产物可分泌表达,并易于纯化和大规模生产等方面的优势。哺乳动物细胞表达系统能够为重组人源蛋白提供较接近于天然状态的翻译后修饰,在蛋白表达过程中会形成接近天然蛋白的蛋白质折叠和聚合,具备活性蛋白所必须的空间结构和修饰。由哺乳动物细胞翻译后再加工修饰产生的外源蛋白质,在活性方面高于原核表达系统及酵母、昆虫细胞等真核表达系统,更接近于天然蛋白质。这一特性使得哺乳动物细胞表达系统在重组蛋白药物,特别是治疗性重组单抗药物的研发和生产中的应用。
哺乳动物细胞表达系统是复杂糖基化蛋白的表达系统,与其他系统相比存在以下优势:可提供复杂的N型糖基化与准确的O型糖基化修饰、保留其生物活性更接近天然蛋白。
百欧泰蛋白表达技术团队拥有丰富的CHO及HEK293细胞表达经验,同时可以提供标签切除、去除内毒素、无血清悬浮培养等多种特殊要求,为客户提供服务。
服务步骤
1 基因合成及密码子优化(可选)
基因序列通过密码子优化后,蛋白表达量可提高几倍至数十倍
2 载体构建
表达载体、细胞的选择
根据客户具体实验要求,选择适合表达载体与细胞(HEK293/CHO细胞)
克隆至表达载体
质粒测序
大量质粒制备
周期:1-2周
3 瞬时转染
细胞瞬时转染
小试
表达分析鉴定(WB)
4 蛋白表达及纯化
优化条件
亲和层析
重组蛋白鉴定
周期:1-2周
5 大量表达及纯化(可选)
周期:2-3周
6 交付结果(可商榷)
测序报告
纯化蛋白
SDS-PAGE/WB报告
COA
服务优势
哺乳动物蛋白表达系统中细胞瞬时转染表达能够快速灵活的制备重组蛋白,细胞在转染后合适时机即能可收获并进行分析。综合有以下特点:
l 高效表达
l 加工完善
l 接近天然蛋白形式
百欧泰团队具有丰富的哺乳动物系统蛋白表达经验,可提供多种服务优势:
l 体系成熟:经验丰富,项目成功比例大于95%;
l 服务为主:可根据蛋白特性与客户需求综合分析,设计不同的实验方案,并对客户整体表达体系进行摸索与优化。
l 自我完善:时刻完善蛋白表达的操作步骤,为客户提供高质量蛋白产品。
服务流程
双方沟通一致后确定实验方案,确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付
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