服务简介
单克隆抗体被应用于免疫学、药理学、细胞生物学、微生物学、临床疾病的预防、诊断和治疗及畜牧产品的检测等。其生产方式主要有小鼠体内诱生腹水和杂交瘤细胞体外培养;前者生产成本低,是用于体外应用的主要生产方式。但无论哪种方式生产的单抗,均含有大量的杂蛋白,主要包括白蛋白、转铁蛋白、血清白蛋白、a-巨球蛋白、脂类蛋白以及其他宿主蛋白等,不能直接应用于体外。因此需对单抗进行后续的纯化,以达到使用要求。
抗体纯化方法比较多,有盐析法、辛酸-硫酸铵沉淀法、冷酒精沉淀法、也有离子交换层析法、Protein A,G,A/G纯化法、抗原亲和纯化法。百欧泰为客户提供多种可选择性纯化方法,为客户综合分析,提供满意的服务。致力于基因、重组蛋白、抗体、噬菌体文库等生物制剂的研发,为客户提供一站式的CRO技术服务。
服务步骤
1 腹水预处理
二氧化硅吸附法和过滤离心法:除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以及脂肪滴等
2 腹水提取
二氧化硅吸附法
硫酸铵沉淀法
辛酸-硫酸铵沉淀法
凝胶过滤
亲和层析
离子交换层析
3 抗体鉴定
ELISA检测
SDS-PAGE
Western Blot
4 交付
质量检测报告
常用方法
1 辛酸-硫酸铵沉淀法
特点:该法简单易行,适合于提纯IgG1和IgG2b,但对IgG3和IgA的回收率及纯化效果差。
2 优球蛋白沉淀法
特点:该法适用于IgG3和IgM型单抗的提取,所获制品的抗体活性几乎保持不变,对IgG3单抗的回收率高于90%,对IgM单抗的回收率为40-90%不等。
3 离子交换层析
特点:常用于工业提纯,主要用于去除非抗体蛋白及亲和层析中混入的配基、内毒素等。
4 Protein A/G亲和层析
特点:是血清、腹水、细胞培养液中纯化单抗较为快捷的方法,一步层析纯度可达95%左右。猪、兔多克隆抗体纯化应用Protein A较多;大鼠单抗、山羊多抗常选用Protein G。
服务优势
百欧泰团队具有丰富的抗体制备经验,可提供多种服务优势:
l 保证极高的成功率与快速交付速度;
l 服务为主:价格合理,可根据客户需求综合分析,为客户提供满意的结果;
l 专业的技术支持,保障强力、周到及时的售前售后服务支持,随时为您解答出现的任何问题;
l 完整的上下游服务:提供从抗体制备、抗体测序,抗体标记修饰一站式技术服务,节约客户宝贵时间和经费。
服务流程
双方沟通一致后确定实验方案,确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付
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