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鼠单克隆抗体制备服务

服务编号：BIOFW004

服务简介

单克隆抗体是由激活的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成的单克隆杂交瘤细胞产生的。小鼠单克隆抗体是常见的单克隆抗体。同时小鼠也是生物学和医学领域中常见的模式动物之一。

抗体主要由B淋巴细胞合成。每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。动物脾脏内有上百万种不同的B淋巴细胞系，含遗传基因不同的B淋巴细胞可以合成不同的抗体。当机体受外界抗原刺激后，可诱发免疫反应，产生相应的抗体，即单克隆抗体。B淋巴细胞能够产生抗体，但在体外不能进行无限分裂，而肿瘤细胞在体外培养的条件下可以无限传代，是“永久”的细胞，但不能产生抗体。因此将骨髓瘤细胞与经免疫过的小鼠的脾细胞在聚乙二醇等介导下发生融合，融合后的杂交瘤细胞具有两种亲本细胞的特性，一方面可以分泌特定的抗体，另一方面也具备了肿瘤细胞无限增殖的能力，可在体外培养条件下或移植到体内无限增殖，从而分泌大量单克隆抗体。

百欧泰多年来致力于抗体制备研究。我们拥有经验丰富的抗体制备技术人员，积累了充足的抗体定制和重组蛋白生产经验，能够为客户提供包括兔源，鼠源，驼源，羊源，鸡源及鲨鱼类等不同物种的重组单克隆抗体制备服务。依托于抗体平台、蛋白平台等完善的平台体系建设，提供一站式技术服务。包括抗原设计、抗体修饰、DNA合成、质粒构建、蛋白表达、蛋白纯化、蛋白修饰、多肽合成、多肽修饰、多肽与载体蛋白交联、小分子结构分析及与载体蛋白交联等。如客户需要，我们还提供抗体提纯及抗体鉴定服务。

鼠单克隆抗体制备

样品要求

客户提供制备抗体所需蛋白或多肽片段，抗原纯度＞85%，数量＞10 mg，浓度＞1 mg/ml。若抗原为小分子多肽和化合物等半抗原，在免疫前需偶联载体蛋白，载体类型包括BSA, KLH, HRP, OVA。

客户提供的抗原信息应包含蛋白抗原的英文全称、种属信息、GeneID 核酸序列或氨基酸序列信息；化合物抗原应提供化学结构式、活性基团、溶解性等信息。

请提前说明样品来源、生物危害以及其他特殊情况。

鼠单克隆抗体制备

百欧泰能够为客户提供鼠单克隆抗体制备服务，利用细胞融合技术制备杂交瘤细胞系。由骨髓瘤细胞和分泌抗体的B淋巴细胞融合（全人源单克隆抗体制备技术除外）后形成杂交瘤细胞并分泌单克隆抗体，由于其只作用于抗原复合分子上某一抗原决定簇，因此具有专一性强、效价高等特点。

免疫动物

免疫动物是用目的抗原免疫小鼠，使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。选用6-8周龄Balb/c健康雌性小鼠，按照预先指定的免疫方案进行免疫注射。抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官，刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖，并分化成为致敏B淋巴细胞。（抗血清制备-免疫动物）

细胞融合、筛选和亚克隆

选取血清效价满足要求的小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合，有限稀释融合细胞，进行克隆化，HAT筛选杂交瘤细胞，经免疫原检测，挑选阳性克隆，进行亚克隆扩大培养，ELISA筛选阳性亚克隆，并进行扩大培养，小鼠经过融合、有限稀释法的一次克隆及上清检测，得到多株符合项目要求的细胞株，选择其中的细胞株进行后续腹水制备。

单克隆抗体的大量制备

(1) 动物体内诱生法

取Balb/c小鼠，腹腔注射降植烷或液体石蜡进行预处理。腹腔注射接种杂交瘤细胞。待小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水，即可获得大量单克隆抗体。

(2) 体外培养法

体外使用旋转培养管大量培养杂交瘤细胞。从上清液中获取单克隆抗体，通过离心，去除细胞及其碎片，即可获得单克隆抗体。

单克隆抗体纯化

对于腹水通过采用二氧化硅吸附法和过滤离心法，除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以及脂肪滴。对于体外培养杂交瘤细胞，从上清液中获取单克隆抗体，通过离心，去除细胞及其碎片，即可获得单克隆抗体。

抗体提取：取用二氧化硅吸附法、硫酸铵沉淀法、辛酸-硫酸铵沉淀法、凝胶过滤、亲和层析、离子交换层析等方法。

抗体鉴定：ELISA检测、SDS-PAGE、Western Blot等方法进行鉴定。

服务优势

保证较高的成功率与快速交付速度；

丰富的抗体表达载体资源，严格的质控体系，GMP级的操作水平，保证结果可靠；

高抗体效价：制备得到高效价和高灵敏度的豚鼠单抗，保证交付量，满足实验需求；

服务为主：价格合理，可根据客户需求综合分析，为客户提供满意的结果；

专业的技术支持，保障强力、周到及时的售前售后服务支持，随时为您解答出现的问题；

完整的上下游服务：提供从抗体制备、抗体测序，抗体标记修饰一站式技术服务，节约客户宝贵时间和经费。

服务流程

双方沟通一致后确定实验方案，确定服务要求-签订合同—预付款-开始实验-成果交付

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